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流式細(xì)胞儀儀器的操作和使用

更新時間:2016-10-28瀏覽:3792次
  流式細(xì)胞儀是對細(xì)胞進(jìn)行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把的細(xì)胞亞群從中分選出來。多數(shù)流式細(xì)胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個細(xì)胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標(biāo),而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說,它的細(xì)節(jié) 分辨率為零。
  流式細(xì)胞儀儀器的操作和使用
  ①打開電源,對系統(tǒng)進(jìn)行預(yù)熱;
  ②打開氣體閾,調(diào)節(jié) 壓力,獲得適宜的液流速度;開啟光源冷卻系統(tǒng);
  ③在樣品管中加入去離子水,沖洗液流的噴嘴系統(tǒng);
  ④利用校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)樣品,調(diào)整儀器,使在激光功率、光電倍增管電壓、放大器電路增益調(diào)定的基礎(chǔ)上,0和90散射的熒光強(qiáng)度強(qiáng),并要求變異系數(shù)為小;
  ⑤選定流速、測量細(xì)胞數(shù)、測量參數(shù)等,在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品;同時選擇計算機(jī)屏上數(shù)據(jù)的顯示方式,從而能直觀掌握測量進(jìn)程;
  ⑥樣品測量完畢后,再用去離子水沖洗液流系統(tǒng);
  ⑦因為實驗數(shù)據(jù)已存入計算機(jī)硬盤(有的機(jī)器還備有光盤系統(tǒng),存貯量更大),因此可關(guān)閉氣體、測量裝置,而單獨(dú)使用計算機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理;
  ⑧將所需結(jié)果打印出來。
  流式細(xì)胞儀操作和使用中的注意事項
  1)光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件,暴露的較強(qiáng)的光線下以后,需要較長時間的“暗適應(yīng)”以消除或降低部分暗電流本底才能工作;另外還要注意磁屏蔽;
  2)光源不得在短時間內(nèi)(一般要1h左右)關(guān)上又打開;使用光源必須預(yù)熱并注意冷卻系統(tǒng)工作是否正常;
  3)液流系統(tǒng)必需隨時保持液流暢通,避免氣泡栓塞,所使用的鞘流液使用前要經(jīng)過過濾、消毒;
  4)注意根據(jù)測量對象的變換選用合適的濾片系統(tǒng)、放大器的類型等;
  5)特別強(qiáng)度每次測量都需要對照組。
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